IVACE - FEDER FIVEX

Objectif

L’objectif général du présent projet consiste à étudier et évaluer les méthodologies de production, d’isolement et de caractérisation de la fonctionnalité des VEs obtenues à partir de différentes sources pour leur application comme ingrédients fonctionnels dans différents secteurs industriels.

Le projet vise à aborder l’identification de nouvelles sources de VEs, ainsi que la production et le développement de méthodologies d’isolement évolutives, jusqu’à la conception de tests d’évaluation fonctionnelle, de caractérisation et de stratégies de conservation. Pour atteindre l’objectif général proposé, les objectifs particuliers suivants sont présentés :

Revue scientifique et technique des principales sources et fonctionnalités qui leur sont associées, des méthodologies d’isolement actuellement utilisées pour l’obtention de VEs,et des stratégies de conservation : Identification et sélection des sources et fonctionnalités des VEs, stratégies pour leur purification et conservation. Outre la revue de la littérature, la collaboration avec les entreprises apportant des informations sur ces aspects sera essentielle.
Encadrement juridique des VEs comme ingrédient fonctionnel dans les secteurs agricole, alimentaire, cosmétique et pharmaceutique : Connaître le cadre juridique pour la commercialisation des VEs comme nouvel ingrédient pour leur incorporation dans des produits des secteurs identifiés.
Standardisation du processus d’isolement de VEs évolutif, indépendamment de leur origine : Conception d’un système de purification permettant la séparation des VEs évolutive au niveau industriel et applicable à des VEs de différentes sources.
Obtention de VEs de différentes origines pour valider le flux de travail standardisé Caractérisation morphologique et fonctionnelle des VEs obtenues, en considérant comme source de VEs de possibles sous-produits dérivés de l’industrie agroalimentaire.
Développement de techniques pour l’évaluation fonctionnelle des VEs : Conception optimisée de méthodes d’évaluation plus complexes du potentiel bioactif des VEs produites et isolées dans le cadre du projet, en sélectionnant les fonctions demandées par les entreprises des secteurs impliqués. Cela sera complété par une caractérisation protéomique des VEs présentant le plus grand potentiel pour leur application industrielle.
Définition d’un protocole de conservation des VEs à long terme : Application des stratégies de conservation actuelles, ainsi que d’autres appliquées à des structures biologiques similaires afin de définir un protocole de conservation permettant leur stockage à long terme sans compromettre leur viabilité.

Activités

Revue scientifique et technique de l’état de l’art de l’application des VEs dans différents secteurs selon leur origine. Encadrement juridique
Isolement de VEs. Conception d’un flux standardisé
Production de VEs à partir de différentes sources d’intérêt.
Évaluation in vitro de l’activité fonctionnelle des VEs
Conservation des VEs
Communication et diffusion
Transfert et promotion des résultats
Gestion et coordination

Résultats obtenus

Au cours de l’exécution du FIVEX, la revue bibliographique et juridique a été achevée, permettant d’obtenir une vision globale de l’utilisation des vésicules extracellulaires (VEs) dans différents secteurs (alimentation, cosmétique, pharma et agricole) et de sélectionner les sources, techniques d’isolement et de conservation appliquées dans les différentes activités techniques du projet.

Un flux de travail standardisé a été conçu pour l’isolement de VEs, adaptable selon la source, et validé par l’obtention et la caractérisation initiale de VEs (taille, nombre de particules, morphologie, biocompatibilité et effet immunomodulateur). Dans l’évaluation fonctionnelle des VEs, des protocoles in vitro ad hoc ont été développés pour des applications orales et topiques de VEs, en évaluant la résistance à la digestion gastrique et le transport à travers les barrières épithéliale et dermique, ainsi que les fonctionnalités associées à la santé dermique dans des VEs obtenues à partir de trois probiotiques sélectionnés.

Enfin, des progrès ont été réalisés dans les stratégies de conservation des VEs, en optimisant les paramètres pour le spray drying et en comparant avec des méthodes de référence (PBS -80 °C, lyophilisation avec tréhalose), bien que des améliorations restent à apporter pour garantir la transformabilité industrielle.